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菊花种苗矮化试管繁殖研究

日期: 2019-02-05 21:51 浏览次数 :

菊花种苗矮化试管繁殖研究
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以开封菊花试管苗为材料,分别设计6-BA、IBA、NAA各4个水平,通过正交试验来研究外源激素对矮化菊花试管苗生长的影响,结果表明对矮化试管菊花苗快速繁殖影响最大的是外源生长素的含量,在只添加细胞分裂素的培养基中外植体无法分化出芽体。适合矮化菊花试管苗快繁的最佳外源激素组合为1_5 mg/L 6-BA+0.075 mg/L NAA。
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菊花属菊科菊属,原产我国,多年生宿根草本植物。株高20-200 cm,通常为30-90 cm。茎嫩绿色或褐色,直立分枝,基部半木质化。单叶互生,卵圆至长圆形,边缘有缺刻及锯齿。头状花序顶生或腋生,1朵或数朵簇生。因其具有较髙的观赏价值,我们从2006年起做了一系列的研究,已经获得了菊花耐盐的菊花试管苗和矮化试管菊花种苗。本试验通过正交设计对菊花苗矮化试管化快繁进行研究,以期为菊花种苗矮化试管产业化提供试验依据。
1材料与方法
1.1材料
试验用材料为侯仁浩等[4]经过矮化获得的试管菊花苗。将其在齐向英等筛选的MS+1.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L IBA+0.01 mg/L TDZ中培养25 d作为试验用材料。
1.2方法
实验设计:以MS培养基为基本培养基、附件52 g/L琼脂和20g/L蔗糖。6-BA、IBA、NAA为外源激素。分别设置6-BA 1.0 mg/L、1.5 mg/L、2.0和2.5 mg/L 4个水平;IBA 0 mg/L、0.25 mg/L、0.5 mg/L和0.75 mg/L 4个水平;NAA浓度0.1 mg/L、0.075 mg/L、0.05 mg/L、0 mg/L。
将矮化试管菊花苗修剪成2.0 cm含茎尖,接人继代培养基中,在光照强度(1 700±200)lx、光照时间12 h/d、湿度65%~80%条件下培养。以培养30 d的数据来作试验分析。每个处理随即抽取30个外植体做统计分析。
2结果与分析
在培养后10 d,矮化试管菊花苗在继代培养基中F5中最先分化出芽体,芽体呈簇生状态,随着培养时间的增加簇生的幼苗逐渐展开,形成有茎形态的无根试管菊花苗。从培养后15 d开始,除F13外的其余培养基中均陆续不断地分化出丛生芽。直到培养结束,F13中始终没有分化出任何芽体。F3、F4和F14的分化能力较弱,繁殖系数均没有达到4 以上,其中F5的繁殖系数达到9.66。
6-BA对矮化试管菊花苗继代培养的影响
随6-BA浓度的增大,矮化试管菊花苗的繁殖系数呈现先升髙后降低的趋势,其中在6-BA为1.0、1.5、2.0、2.5 mg/L时繁殖系数分别为4.54 5,6.972 5、6.112 5、4.577 5。在6-BA浓度为1.5 mg/L时最大,6-BA浓度为1.0 mg/L时最小,极差为2.427 5。
IBA对矮化试管菊花苗继代培养的影响
随IBA浓度的增大,矮化试管菊花苗的繁殖系数一直呈现降低的趋势。在IBA浓度为0、0.25、0.5、0.75 mg/L时,矮化试管菊花苗的繁殖系数分别为6.44,5.707 5、5.655、
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3讨论
花卉的组培和快繁一直是花卉生产的重点,菊花的组培快繁研究较多。梁称福等[5]在大头菊上组培的结果表明,在MS+1.0 mg/L BA+0.1 mg/L NAA、MS+2.0 mg/L BA+0.1 mg/L NAA、MS+3.0 mg/L BA+0.1 mg/L NAA的增殖培养基上培养2?d后芽增殖3.65-5.90倍;但其接种的个数太少,仅有20个外植体。任旭琴等[6]以千头菊为材料发现较高浓度的6-BA能促进芽的形成,在2.0~3.0 mg/L 6-BA之间的腋芽生长速度最快,长度可以达到1.6 cm;并且发现较髙浓度的NAA会抑制芽的形成。这与本研究中IBA的结论相似。邓年方等⑺以菊花花瓣建立无性系,在快繁中发现6-BA和NAA对促进愈伤组织诱导、丛生芽的形成具有显着的效果,诱导愈伤组织和丛生芽的最佳培养基是MS+1.5 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA,以IBA作为外源激素的诱导能力低于用NAA。张红以绿牡丹的幼嫩枝建立无性系后发现丛生芽增殖培养的最佳培养基为MSi+0.2 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA。刘忠荣w对菊花的组培快繁做了综述,认为菊花继代快繁可以用初代培养中较好的培养基。王康才等[1°]对杭菊花(大白菊、小白菊、黄菊)始花期花蕾的花瓣做组培研究的结果表明,以MS+0.2 mg/L NAA+2 mg/L KT培养基较好,培养40 d后芽分化率为72.2%~81.8%。刘鹏等[11]以陕西的九月菊为材料研究发现,IAA与6-BA的配比对菊花有促进生长的作用,而低浓度的NAA或IAA与6-BA配比使菊花的生长滞化,甚至死亡。刘兴玉等〖121以菊花花瓣为外植体的研究发现MS+3.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA最适合继代培养。本研究的结果表明矮化试管菊花苗最适继代培养基为MS+1.5 mg/L 6-BA+0.075 mg/L NAA,与上述研究的差别可能是外植体不同引起的。
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